高二生物选修三基因工程知识点

　　基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。接下来学习啦小编为你整理高二生物选修三基因工程知识点，一起看看吧!

　　高二生物选修三基因工程知识点【一】

　　基因工程的基本操作程序

　　1.目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。

　　(1)获取方法：从基因文库中获取目的基因

　　(2)人工合成法：化学方法合成DNA片段(反转录法、直接合成法)

　　(3)PCR反应扩增DNA

　　2.PCR技术扩增目的基因

　　(1)PCR的含义：聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。

　　(2)目的：获取大量的目的基因

　　(3)原理：DNA双链复制

　　(4)过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链;

　　第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合;

　　第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。

　　高二生物选修三基因工程知识点【二】

　　基因表达载体的构建(核心)

　　1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

　　2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因

　　(1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

　　(2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。

　　(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

　　3.重组质粒形成过程:

　　(1)用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。

　　(2)用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。

　　(3)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子(重组质粒)

　　高二生物选修三基因工程知识点【三】

　　将目的基因导入受体细胞—转化

　　1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：

　　将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉 管通道法等。

　　将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。方法的受体细胞多是 受精卵。

　　将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞 ，再将重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

　　3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。

　　高二生物选修三基因工程知识点【四】

　　目的基因的检测和表达

　　1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。

　　2.其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。

　　3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原—抗体杂交技术。

　　4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。